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實驗室細胞培養被污染的處理方法
  • 更新日期:2024-03-14      瀏覽次數:530
    • 實驗室細胞培養中常見的生物污染包括細菌污染、霉菌污染、支原體污染、黑點污染、真菌污染和原生動物污染。

      1、細菌污染

      細菌在普通倒置顯微鏡下呈黑色和細砂狀。根據感染菌的種類不同,可能會呈現不同的形狀,培養液一般會變得渾濁、黃色,對細胞生長有明顯影響。


      2、霉菌污染

      正常情況下,培養基在 37℃ 培養箱中培養兩三天,在倒置顯微鏡下仍保持透明,無雜質。一旦出現絮狀雜質,顯微鏡下可見絲狀和團塊狀漂浮物,菌絲明顯。此時,雖然細胞仍在生長,但它們的生命狀態會在長時間后逐漸惡化。


      3、支原體污染

      支原體是隱蔽的污染物,不能通過過濾去除。顯微鏡下沒有任何可見的支原體污染跡象,比如細胞病變和濁度或 pH 值變化(即使在嚴重污染的培養基中),這樣就會導致我們產生錯誤的安全感。而在牛血清中,支原體是最常見的微生物之一。


      4、黑點污染

      黑色的游動點能穿透濾膜并在空氣中擴散。它們在低倍鏡下顯示為黑色圓點,在高倍鏡下顯示為可移動的黑色斑點。培養液也不渾濁,一般影響較小,因此細胞仍可使用。通常,黑點污染后,細胞生長良好,運動物體無明顯增加,培養基的顏色和透明度無明顯變化。在同一批血清培養的細胞中也可以發現類似的現象。


      5、真菌污染

      真菌污染后,培養基一般清澈,保持原色。細絲可以在顯微鏡下觀察到。最初,一些真菌類似于死細胞碎片,但其中許多清晰可見,看起來像珊瑚,比較容易區分。此外,它們會慢慢長出細細的黑色細絲,因為它們生長得比較慢,不像細菌那樣容易被發現,一旦發現培養基被污染,它們將很難存活。


      6、原生動物污染

      原生動物污染后,細胞培養基變得輕微渾濁。在顯微鏡下,大量的小點來回移動。雖然此時細胞仍能生長,但繁殖速度減慢,細胞生長狀態不好,邊緣不清,變得不透明。原生動物與細胞形成共生關系。同時,原生動物與細胞競爭營養。這種共生現象非常普遍,但以細胞為主,因為原生動物的數量相對較少,因而對細胞的正常生長沒有影響,只有當它們達到一定數量時,才最終爆發成為惡性循環。

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